Какой метод лучше?
—Тесты для диагностики инфекции SARS-CoV-2
Для подтвержденных случаев COVID-19 общие клинические симптомы включают лихорадку, кашель, миалгию или утомляемость.Тем не менее, эти симптомы не являются уникальными особенностями COVID-19, поскольку они аналогичны симптомам других вирусных заболеваний, таких как грипп.В настоящее время ПЦР в реальном времени (rt-PCR) на нуклеиновые кислоты вируса, КТ и некоторые гематологические параметры являются основными инструментами для клинической диагностики инфекции.Многие наборы для лабораторных тестов были разработаны и использованы для тестирования образцов пациентов на COVID-19 китайским CDC.1, Центр по контролю и профилактике заболеваний США2и другие частные компании.Серологический тест на антитела IgG/IgM также был добавлен в качестве диагностического критерия в обновленную китайскую версию рекомендаций по диагностике и лечению новой коронавирусной болезни (COVID-19), которая была выпущена 3 марта.1.Тест RT-PCR на нуклеиновые кислоты вируса до сих пор является стандартным диагностическим методом для диагностики COVID-19.
СтронгСтеп®Набор для мультиплексной ПЦР в реальном времени Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) (обнаружение трех генов)
Тем не менее, эти наборы для ПЦР в реальном времени, предназначенные для поиска генетического материала вируса, например, в носовых, оральных или анальных мазках, имеют множество ограничений:
1) Эти тесты имеют длительные сроки выполнения и сложны в эксплуатации;обычно для получения результатов требуется в среднем от 2 до 3 часов.
2) Для проведения ПЦР-тестов требуются сертифицированные лаборатории, дорогостоящее оборудование и обученный технический персонал.
3) Есть некоторое количество ложноотрицательных результатов ОТ-ПЦР на COVID-19.Это может быть связано с низкой вирусной нагрузкой SARS-CoV-2 в образце мазка из верхних дыхательных путей (новый коронавирус в основном поражает нижние дыхательные пути, такие как легочные альвеолы), и тест не может идентифицировать людей, которые перенесли инфекцию, выздоровели и очистили свой организм от вируса.
Исследование Lirong Zou et al.4обнаружили, что более высокие вирусные нагрузки были обнаружены вскоре после появления симптомов, при этом более высокие вирусные нагрузки были обнаружены в носу, чем в горле, а характер выделения вирусной нуклеиновой кислоты у пациентов, инфицированных SARS-CoV-2, напоминает таковой у пациентов с гриппом.4и выглядит иначе, чем у пациентов, инфицированных SARS-CoV-2.
Ян Пан и др.5изучили серийные образцы (мазки из горла, мокроты, мочи и кала) от двух пациентов в Пекине и обнаружили, что вирусная нагрузка в образцах мазка из горла и мокроты достигла пика примерно через 5–6 дней после появления симптомов, образцы мокроты обычно демонстрировали более высокую вирусную нагрузку, чем образцы мокроты. образцы мазка из зева.Вирусная РНК не была обнаружена в образцах мочи или стула этих двух пациентов.
ПЦР-тест дает положительный результат только тогда, когда вирус все еще присутствует.Тесты не могут идентифицировать людей, которые перенесли инфекцию, выздоровели и очистили свой организм от вируса.На самом деле только около 30–50% пациентов с клинически диагностированной новой коронавирусной пневмонией были положительными на ПЦР.Многие пациенты с новой коронавирусной пневмонией не могут быть диагностированы из-за отрицательного теста на нуклеиновые кислоты, поэтому они не могут получить соответствующее лечение вовремя.С первого по шестое издание руководства, опираясь исключительно на результаты диагностики нуклеиновых кислот, что доставляло большие неприятности клиницистам. Самый ранний «разоблачитель», доктор Ли Вэньлян, офтальмолог из Уханьского центрального Больница, мертв.При жизни у него было три теста на нуклеиновые кислоты в случае лихорадки и кашля, и в последний раз он получил положительный результат ПЦР.
После обсуждения экспертами было принято решение расширить методы исследования сыворотки в качестве нового диагностического критерия.В то время как тесты на антитела, также называемые серологическими тестами, могут подтвердить, был ли кто-то инфицирован, даже после того, как его иммунная система избавилась от вируса, вызывающего COVID-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM антитела экспресс-тест
Тест на антитела IgG/IgM поможет отследить гораздо более популяционным способом, кто перенес инфекцию, потому что многие случаи, по-видимому, распространяются от бессимптомных пациентов, которых нелегко идентифицировать.Пара в Сингапуре, муж дал положительный результат ПЦР, результат ПЦР его жены был отрицательным, но результаты теста на антитела показали, что у нее были антитела, как и у ее мужа.
Серологические анализы должны быть тщательно проверены, чтобы быть уверенными, что они надежно реагируют, но только на антитела против нового вируса.Одна из проблем заключалась в том, что сходство между вирусами, вызывающими тяжелый острый респираторный синдром, и COVID-19 может привести к перекрестной реактивности.IgG-IgM, разработанный Сюэ Фэн Ван6считалось, что его можно использовать в качестве теста по месту оказания медицинской помощи (POCT), поскольку его можно проводить у постели больного с кровью из пальца.Набор имеет чувствительность 88,66% и специфичность 90,63%.Однако все равно были ложноположительные и ложноотрицательные результаты.
В обновленной китайской версии руководства по диагностике и лечению новой коронавирусной болезни (COVID-19)1, подтвержденные случаи определяются как подозрительные случаи, которые соответствуют любому из следующих критериев:
(1) Образцы дыхательных путей, образцы крови или кала дали положительный результат на нуклеиновую кислоту SARS-CoV-2 с помощью ОТ-ПЦР;
(2) Генетическое секвенирование вируса из образцов образцов дыхательных путей, крови или стула в высокой степени гомологично известному SARS-CoV-2;
(3) Сывороточные антитела IgM и IgG, специфичные к новому коронавирусу, были положительными;
(4) Уровень сывороточных новых антител IgG, специфичных к коронавирусу, измененный с отрицательного на положительный, или антитела IgG, специфичные к коронавирусу, в период выздоровления в 4 раза выше, чем в остром периоде.
Диагностика и лечение COVID-19
| Методические рекомендации | Опубликовано | Подтвержденные диагностические критерии |
| Версия 7-я | 3 марта 2020 г. | ❶ ПЦР ❷ НГС ❸ IgM+IgG |
| Версия 6-я | 18 фев.2020 | ❶ ПЦР ❷ НГС |
Ссылка
1. Руководство по диагностике и лечению новой коронавирусной пневмонии (пробная версия 7, Национальная комиссия здравоохранения Китайской Народной Республики, выпущенная 3 марта 2020 г.)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. В исследованиях используется только протокол RT-PCR в реальном времени для идентификации 2019-nCoV.
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Сингапур заявляет о первом использовании теста на антитела для отслеживания коронавирусных инфекций.
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в образцах верхних дыхательных путей инфицированных пациентов 19 февраля 2020 г. DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в клинических образцах Lancet Infect Dis 2020 Опубликовано в Интернете 24 февраля 2020 г. (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Разработка и клиническое применение экспресс-теста на комбинированные антитела IgM-IgG к SARS-CoV-2.
Диагностика инфекции XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Время публикации: 17 марта 2020 г.
