Один мир один бой
─ Международное сотрудничество по созданию глобального сообщества общей судьбы, реагирующей на проблему пандемии Covid-19
Роман коронавируса, подметающий по всему миру, привел к постоянному глобальному пандемическому кризису Covid-19. В романе Коронавируса нет границ, ни одна страна не будет избавлена от этой битвы против Covid-19. В ответ на эту всемирную пандемию Covid-19 Pandemic, Liming Bio-Products Corp вносит вклад в поддержку благополучия наших глобальных сообществ.
Наш мир в настоящее время сталкивается с беспрецедентным воздействием новой пандемии Coronavirus 2019 (Covid-19). На сегодняшний день нет эффективного препарата для лечения этого заболевания. Тем не менее, было разработано много диагностических тестов для обнаружения COVID-19. Эти тесты основаны на молекулярных или серологических методах для обнаружения новых яростных нуклеиновых кислот или биомаркеров антител. Поскольку Covid-19 достиг пандемического статуса, ранняя диагностика новой инфекции коронавируса имеет решающее значение для оценки распространения вируса и его содержания, но идеального теста для универсального использования еще не существует. Мы должны знать, какие тесты могут потенциально использоваться для скрининга, диагностики и мониторинга инфекции Covid-19 и каковы их ограничения. Очень важно, как лучше использовать эти научные инструменты и помочь выявить и контролировать появление этого быстро распространенного и серьезных заболеваний.
Цель обнаружения нового коронавируса состоит в том, чтобы определить, имеет ли человек, у которого есть инфекция Covid-19 или асимптотический носитель, который может молча распространять вирус, чтобы предоставить важную информацию для принятия решений для клинического лечения. Предыдущие исследования показали, что 70% клинических решений зависят от результатов тестирования. Когда используются различные методы обнаружения, требования комплектов реагента обнаружения также различаются.
Рисунок 1
Рисунок 1:Диаграмма, показывающая ключевые этапы общих уровней биомаркеров во время типичного временного курса инфекции Covid-19. Ось X указывает на количество дней инфекции, а ось Y указывает на вирусную нагрузку, концентрацию антигенов и концентрацию антител в разные периоды. Антитела относится к антителам IgM и IgG. Как ОТ-ПЦР, и обнаружение антигена используются для обнаружения наличия или отсутствия нового коронавируса, что является прямым доказательством раннего обнаружения пациентов. В течение недели после вирусной инфекции обнаружение ПЦР или обнаружение антигена является предпочтительным. После новой инфекции коронавируса в течение около 7 дней антитело IgM против нового коронавируса постепенно увеличивалось в крови пациента, но продолжительность существования короткая, и его концентрация быстро уменьшается. Напротив, антитело IgG против вируса появляется позже, обычно примерно через 14 дней после вирусной инфекции. Концентрация IgG постепенно увеличивается, и она сохраняется длительный период в крови. Таким образом, если IGM обнаруживается в крови пациента, это означает, что вирус недавно заразился, что является маркером ранней инфекции. Когда антитело IgG обнаруживается в крови пациента, это означает, что вирусная инфекция была в течение некоторого времени. Это также называется поздняя инфекция или предыдущая инфекция. Это часто наблюдается у пациентов, которые находятся на этапе восстановления.
Биомаркеры романа коронавируса
Новый коронавирус представляет собой РНК -вирус, который состоит из белков и нуклеиновых кислот. Вирус вторгается в организм (человека), входит в клетки через сайт связывания, соответствующий рецепторному ACE2 и реплицируется в клетках -хозяева, заставляя иммунную систему человека реагировать на иностранных захватчиков и производить специфические антитела. Следовательно, флаковые нуклеиновые кислоты и антигены, а также специфические антитела против нового коронавируса могут теоретически использоваться в качестве специфических биомаркеров для обнаружения нового коронавируса. Для обнаружения нуклеиновых кислот наиболее часто используется технология ОТ-ПЦР, в то время как серологические методы обычно используются для обнаружения новых антител, специфичных для коронавируса. В настоящее время существует множество методов испытаний, которые мы можем выбрать для тестирования инфекции Covid-19 [1].
Основные принципы основных методов испытаний для нового коронавируса
До сих пор доступны многие диагностические тесты для COVID_19, причем больше тестовых наборов получают одобрение в соответствии с разрешением на чрезвычайное использование каждый день. Несмотря на то, что новые тестовые разработки, выходящие с таким количеством различных имен и форматов, все текущие тесты Covid_19 в основном полагаются на две основные технологии: обнаружение нуклеиновых кислот для вирусной РНК и серологических иммуноанализа, которые обнаруживают вируспецифические антитела (IGM и IgG).
01. Обнаружение нуклеиновой кислоты
Обратная транскрипционная полимеразная цепная реакция (RT-PCR), опосредованная петлей изотермической амплификации (LAMP) и секвенирование следующего поколения (NGS) являются распространенными методами нуклеиновой кислоты для обнаружения новой РНК коронавируса. RT-PCR-это первый тип теста для COVID-19, рекомендованный как Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), так и Центром по контролю и профилактике заболеваний (CDC).
02. Обнаружение серологического антител
Антитело - это защитный белок, продуцируемый в организме человека в ответ на вирусную инфекцию. IGM является ранним типом антитела, тогда как IgG является антителом более позднего типа. Образец сыворотки или плазмы обычно исследуется на наличие специфических типов IgM и IgG антитела для оценки острых и выздоравливающих фаз инфекции Covid-19. Эти методы обнаружения на основе антител включают анализ иммунохроматографии коллоидной золота, иммунохроматографию флуоресцентной микросферы, иммуноферментный анализ (ELISA), а также анализ хемилюминесценции.
03. Обнаружение вирального антигена
Антиген является структурой на вирусе, распознаваемом человеческим организмом, которая запускает систему иммунной защиты для производства антител для очистки вируса из крови и тканей. Вирусный антиген, присутствующий на вирусе, может быть нацелен и обнаружен с использованием иммуноанализа. Подобно вирусной РНК, вирусные антигены также присутствуют в дыхательных путях инфицированных индивидуумов и могут использоваться для диагностики острой фазы инфекции Covid-19. Следовательно, часто рекомендуется собирать образцы верхних дыхательных путей, такие как слюна, носоглотка и ротоглоточные мазки, мокроты с глубоким кашлем, бронхоальвеолярная жидкость лаважа (BALF) для начального тестирования антигена.
Выбор методов тестирования для нового коронавируса
Выбор метода тестирования включает в себя множество факторов, включая клинические условия, контроль качества тестирования, время поворота, затраты на тестирование, методы сбора отбора проб, технические требования к лабораторным персоналу, требования к объектам и оборудованию. Обнаружение нуклеиновых кислот или вирусных антигенов заключается в том, чтобы обеспечить прямые доказательства наличия вирусов и подтвердить диагноз новой инфекции коронавируса. Хотя существует множество методов обнаружения антигена, их чувствительность обнаружения нового коронавируса теоретически ниже, чем у амплификации ОТ-ПЦР. Тестирование антител-это обнаружение антивирусных антител, продуцируемых в организме человека, которое со временем отстает и часто не может использоваться для раннего обнаружения во время острой фазы вирусной инфекции. Клинические условия для применений для обнаружения могут различаться, а сайты сбора образцов также могут быть разными. Для обнаружения вирусных нуклеиновых кислот и антигенов образец должен собираться в дыхательных путях, где присутствует вирус, такие как назоглоточные мазки, ротоглоточные мазки, мокроты или бронхоалвеолярная лаважная жидкость (BALF). Для обнаружения на основе антител необходимо собирать образец крови для наличия специфического антивирусного антитела (IGM/IgG). Однако результаты испытаний на антитела и нуклеиновой кислоты могут дополнять друг друга. Например, когда результатом тестирования является нуклеиновая кислота-отрицательная, IgM-негативная, но-отрицательная, но IgG-позитивная, эти результаты показывают, что пациент в настоящее время не несет вирус, но был извлечен из новой инфекции коронавируса. [2]
Преимущества и недостатки новых тестов на коронавирус
В протоколе диагностики и лечения новой коронавирусной пневмонии (испытательная версия7) (выпущенная Национальной комиссией по здравоохранению и государственным администрированием традиционной китайской медицины 3 марта 2020 года) тестирование нуклеиновых кислот используется в качестве метода золотого стандарта для диагноза номана Инфекция коронавируса, в то время как тестирование на антитела также рассматривается как один из методов подтверждения для диагноза.
Патогенные и серологические результаты
(1) Патогенные результаты: новая я нуклеиновая кислота коронавируса может быть обнаружена в мазках носоглотки, мокроте, выделениях нижних дыхательных путей, крови, кале и других образцах с использованием методов RT-Pcrand/или NGS. Это более точное, если образцы получают из нижних дыхательных путей (мокрота или экстракция воздушного пути). Образцы должны быть представлены для тестирования как можно скорее после сбора.
(2) серологические результаты: специфический IGM вируса NCP становится обнаруживаемым примерно через 3-5 дней после начала; IgG достигает титрования, по меньшей мере, в 4-кратном увеличении во время восстановления по сравнению с острой фазой.
Тем не менее, выбор методов тестирования зависит от географических мест, медицинских норм и клинических условий. В США NIH выпустила Руководство по лечению Coronavirus Deferience 2019 (COVID-19) (обновленная площадка: 21 апреля 2020 года), а FDA выпустила политику диагностических испытаний на заболевание коронавируса-2019. ), в котором серологическое тестирование антител IgM/IgG, выбранное только в качестве скринингового теста.
Метод обнаружения нуклеиновых кислот
RT_PCR - это очень чувствительный тест нуклеиновой кислоты, предназначенный для выявления того, присутствует ли новая РНК коронавируса в дыхании или в другом образе. Положительный результат теста на ПЦР означает наличие новой РНК коронавируса в образце для подтверждения инфекции Covid-19. Отрицательный результат ПЦР -теста не означает отсутствие вирусной инфекции, поскольку на него может быть затронуто плохое качество выборки или момент времени заболевания на извлеченной фазе и т. Д. Хотя ОТ-ПЦР является высокочувствительным тестом, он имеет несколько недостатков. Тесты ОТ-ПЦР могут быть трудоемкими и трудоемкими, что решает, в зависимости от высокого качества образца. Это может быть проблемой, потому что количество вирусной РНК не только сильно варьируется между разными пациентами, но и может варьироваться в зависимости от одного пациента в зависимости от моментов времени, когда образец собирается, а также от фазы инфекции или начало клинических симптомов. Обнаружение нового коронавируса требует высококачественных образцов, которые содержат достаточное количество интактной вирусной РНК.
Тест RT-PCR может дать неверный отрицательный результат (ложный отрицательный) для некоторых пациентов, у которых есть инфекция Covid-19. Как мы знаем, основные сайты инфекции нового коронавируса расположены в легких и нижних дыхательных путях, таких как альвеолы и бронхи. Следовательно, образец мокроты из глубокого кашля или жидкости бронхоалвеолярного лаважа (BALF) считается самой высокой чувствительностью к вирусным обнаружению. Однако в клинической практике образцы часто собираются из верхних дыхательных путей с использованием носоглоточных или ротоглоточных мазков. Сбор этих образцов не только неудобно для пациентов, но и требует специально обученного персонала. Чтобы сделать выборку менее инвазивным или проще, в некоторых случаях пациентам может дать пероральный тампон и позволить им взять образец из слизистой оболочки из щека или, пробивая сами. Без достаточной вирусной РНК RT-QPCR может вернуть ложноотрицательный результат теста. В провинции Хубей, в Китае, чувствительность ОТ-ПЦР в начальном обнаружении сообщалась только около 30-50%, в среднем 40%. Высокий уровень ложного негативного, скорее всего, был вызван недостаточной выборкой.
Кроме того, тест RT-PCR требует, чтобы высококвалифицированный персонал выполнял сложные этапы экстракции РНК и процедуру усиления ПЦР. Это также требует более высокого уровня защиты биобезопасности, специального лабораторного объекта и ПЦР-инструмента в реальном времени. В Китае необходимо провести тест RT-PCR для обнаружения COVID-19 (BSL-2) с защитой персонала с использованием практики Biosabetity Level 3 (BSL-3). В соответствии с этими требованиями, с начала января по начало февраля 2020 года, пропускная способность китайской лаборатории CDC в Китае смогла обнаружить только несколько сотен случаев в день. Обычно это не было бы проблемой при тестировании других инфекционных заболеваний. Однако, имея дело с глобальной пандемией, такой как Covid-19, с потенциально миллионами людей, которые будут проверены, RT-PCR становится критической проблемой из-за его требований к специальным лабораторным оборудованию или техническому оборудованию. Эти недостатки могут ограничить ОТ-ПЦР, чтобы использовать в качестве эффективного инструмента для скрининга, а также может привести к задержкам в отчетах о результатах тестирования.
Метод обнаружения серологических антител
С ходом прохождения болезни, особенно на средних и поздних стадиях, скорость обнаружения антител очень высока. Исследование в больнице Центрального Юга Ухан показало, что уровень обнаружения антител может достигать более 90% за третью неделю инфекции Covid-19. Кроме того, антитело является продуктом иммунного ответа человека против нового коронавируса. Тест антител предлагает несколько преимуществ по сравнению с ОТ-ПЦР. Во -первых, серологические антитела проверяют простые и быстрые. Антитела бокового потока могут использоваться для точки зрения, чтобы обеспечить результат за 15 минут. Во -вторых, целью, обнаруженной серологическим тестом, является антитело, которое, как известно, гораздо более стабильно, чем вирусная РНК. Во время сбора, транспортировки, хранения и тестирования образцы испытаний на антитела, как правило, более стабильны, чем образцы для ОТ-ПЦР. В -третьих, поскольку антитело равномерно распределено в кровообращении, меньше изменений отбора проб по сравнению с тестом нуклеиновой кислоты. Объем образца, необходимый для теста на антитела, относительно невелик. Например, 10 микролитра крови пальца достаточны для использования в боковом тесте антител.
В целом, тест на антитела выбирается в качестве инструмента добавки для обнаружения нуклеиновых кислот для улучшения скорости обнаружения нового коронавируса во время курсов заболевания. Когда тест на антитела используется вместе с тестом на нуклеиновую кислоту, он может повысить точность анализа для диагностики Covid19 за счет снижения потенциальных ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Текущее руководство по эксплуатации не рекомендует использовать два типа теста отдельно в качестве независимого формата обнаружения, но следует использовать в качестве комбинированного формата. [2]
Рисунок 2:Правильная интерпретация результатов теста нуклеиновой кислоты и антител для обнаружения новой инфекции коронавируса
Рисунок 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Новый двойной тестовый комплект Coronavirus IgM/IgG Dual-Rapid (Strongstep®SARS-COV-2 IgM/IgG Rapid Test, латексная иммунохроматография)
Рисунок 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Новый комплект для ПЦР в режиме реального времени Coronavirus (SARS-COV-2) (обнаружение для трех генов, метод флуоресцентного зонда).
Примечание:Этот высокочувствительный, готовый к использованию ПЦР-комплект доступен в лиофилизованном формате (процесс сушки замораживания) для долгосрочного хранения. Комплект можно транспортировать и хранить при комнатной температуре и стабилен в течение одного года. Каждая трубка Premix содержит все реагенты, необходимые для амплификации ПЦР, включая обратную транскриптазу, полимеразу TAQ, праймеры, зонды и подложки DNTPS. Пользователи могут просто восстановить смеси, добавив воду с ПЦР вместе с шаблоном и затем нагрузки. на прибор для ПЦР, чтобы запустить усиление.
В ответ на новую вспышку коронавируса Liming Bio-Products Co., Ltd. быстро работала над разработкой двух диагностических наборов, чтобы позволить лабораториям клинического и общественного здравоохранения быстро диагностировать инфекцию Covid-19. Эти наборы очень подходят для использования для крупномасштабного скрининга в странах и регионах, где новая вспышка коронавируса быстро распространяется, а также для диагностики и подтверждения инфекции Covid-19. Эти наборы предназначены только для предварительного разрешения на чрезвычайное использование (PEUA). Тестирование ограничено лабораториями, сертифицированными в соответствии с правилами национальных или местных властей.
Метод обнаружения антигена
1. Обнаружение вирусного антигена классифицируется в той же категории прямого обнаружения, что и обнаружение нуклеиновой кислоты. Эти методы прямого обнаружения ищут доказательства вирусных патогенов в образце и могут использоваться для диагностики подтверждения. Тем не менее, развитие комплектов для обнаружения антигена требует высокого качества моноклональных антител с сильной аффинностью и высокой чувствительностью, способной распознавать и захватывать патогенные вирусы. Обычно требуется более шести месяцев, чтобы выбрать и оптимизировать моноклональное антитело, подходящее для использования при приготовлении набора для обнаружения антигена.
2. В настоящее время реагенты для прямого обнаружения нового коронавируса все еще находятся на этапе исследований и разработок. Следовательно, ни один комплект для обнаружения антигена не был клинически подтвержден и коммерчески доступен. Хотя ранее сообщалось, что диагностическая фирма в Шэньчжэне разработала набор для обнаружения антигена и клинически протестированная в Испании, надежность и точность анализа не могли быть подтверждены из -за наличия проблем качества реагента. На сегодняшний день NMPA (бывший China FDA) еще не одобрил какой -либо комплект для обнаружения антигена для клинического использования. В заключение было разработано различные методы обнаружения. Каждый метод имеет свои преимущества и ограничения. Результаты различных методов могут быть использованы для проверки и дополнения.
3. Создание качественного тестового комплекта Covid-19 сильно зависит от оптимизации во время исследований и разработок. Liming Bio-Product Co., Ltd. Тестовые наборы необходимы для соответствия строгим производственным и контрольным стандартам, чтобы обеспечить самые высокие уровни производительности и согласованности. Ученые из Liming Bio-Product Co., Ltd. имеют более чем двадцатилетний опыт работы в разработке, тестировании и оптимизации диагностических наборов in vitro, чтобы обеспечить самый высокий уровень производительности в аналитической количественной оценке.
Во время пандемии Covid-19 правительство Китая столкнулось с всплеском огромного спроса на материалы для профилактики эпидемии в международных горячих точках. 5 апреля на пресс-конференции Совместного механизма профилактики и контроля Государственного совета «укрепляет качество управления медицинскими материалами и регулирование порядка рынка», Цзян Фан, инспектор первого уровня министерства министерства. Торговая коммерция сказал: «Далее мы сосредоточимся на двух аспектах, сначала для ускорения поддержки большего количества медикаментов, необходимых международным сообществом, а также для улучшения контроля качества, регулирования и управления продуктами. Мы внесем вклад Китая в совместное реагирование на глобальную эпидемию и создание сообщества с общим будущим для человечества.
Рисунок 5:Liming Bio-Products Co., новый реагент Coronavirus Ltd.
Почетный сертификат
Houshenshan
Рисунок 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. Поддержала госпиталь Wuhan Vulcan (Houshenshan), чтобы бороться с эпидемией Covid-19 и был удостоен почетного свидетельства о Красном Кресте Ухан. Вухан Вулканская горная больница является самой известной больницей в Китае, которая специализируется на лечении тяжелых веществ - 19 пациентов.
Поскольку новая вспышка коронавируса продолжает распространяться по всему миру, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. стремится поддержать и помочь сообществам во всем мире с нашими инновационными технологиями для борьбы с этой беспрецедентной глобальной угрозой. Быстрое тестирование инфекции Covid-19 является важной частью решения этой угрозы. Мы продолжаем вносить значительный вклад, предоставляя высококачественные диагностические платформы в руки передовых работников здравоохранения, чтобы люди могли получить необходимые результаты критического тестирования. Усилия Liming Bio-Products Co., Ltd. в борьбе с пандемией Covid-19 заключаются в том, чтобы внести наши технологии, опыт и опыт в международные сообщества для строительства глобального сообщества судьбы.
Длинная пресса ~ сканируйте и следуйте за нами
Электронная почта: sales@limingbio.com
Веб -сайт: https://limingbio.com
Время публикации: май-01-2020
